重組腺相關病毒 (AAV) 是目前體內基因治療常用的遞送平臺。AAV 的衣殼由三種重疊的病毒蛋白（VP1、VP2、VP3）組裝而成，其典型的化學計量比約為 1:1:10。這三種蛋白的比例分布直接決定了衣殼的轉運能力和最終的轉基因表達效率。因此，對 VP 比例進行高精度的定量分析，是 AAV 效價監控和產品放行的核心質控環節。
最近，中國食品藥品檢定研究院（NIFDC）的研究團隊在國際期刊 Electrophoresis 上發表了最新研究成果。該研究巧妙地結合了樣品前處理與物理學堆積效應，在 ProteinSimple Maurice CE-SDS 平臺上開發出了一種高靈敏、無標記的紫外吸收（UV）檢測方法 ，用詳實的數據證明了 Maurice 系統在 AAV 質控中的性能。
在測定 AAV VP 比例時，分析人員常面臨兩難選擇：
• 激光誘導熒光（LIF）檢測：雖然靈敏度高，但在分離前必須對蛋白進行共價染料標記。這種額外操作不僅可能引入雜質，且不同染料對特定蛋白組分可能存在標記偏差，導致比例失真。
• 紫外（UV）吸收檢測：無需標記，能提供最真實、無偏差的定量數據。但 UV 的固有靈敏度往往不足以準確定量豐度極低的 VP1 和 VP2。
如何兼得“無標記的真實性"與“超高的靈敏度"？本研究團隊在 Maurice 平臺上給出了一套具有巧思的解決方案。
研究團隊將 Maurice 平臺高度自動化的電動進樣（Electrokinetic injection）功能與經典的“樣品堆積（Sample Stacking）"物理效應結合，實現了強悍的性能表現：
通過應用上述“進樣堆積"策略，UV 檢測的靈敏度得到了質的飛躍。
• 數據亮點：在相同的 2.0 × 1012 GC/mL 濃度下，采用堆積進樣法后，蛋白峰面積實現了驚人的 6 倍增長！
• 極限突破：在該方法下，主峰 VP3 的定量限（LOQ）成功下探至 1.2 × 1011 GC/mL。
圖 1：Maurice 系統靈敏度躍升。采用進樣堆積技術（A）較常規進樣（B），VP3 峰面積實現 6 倍信號放大，輕松攻克低豐度定量壁壘。
一個可靠的質控方法，其測定的比例絕不能因樣品濃度的波動而改變。
• 寬線性范圍：研究表明，總 VP 濃度在 2.0 × 1012 至 3.0 × 1013 GC/mL 范圍內呈現出的線性關系（R2 = 0.988）。
• 絕對一致的比例：在確定的最佳上樣濃度范圍內（6.15 × 1012 至 1.85 × 1013 GC/mL），Maurice 能夠極其穩定地輸出 VP1/VP2/VP3 的比例。即使是微量的 VP2 和 VP1，其測定百分比的相對標準偏差（RSD%）也全部保持在 7% 以下。
圖 2：跨濃度的絕對一致性。在6.15 × 1012 至 1.85 × 1013 GC/mL濃度范圍內，Maurice 系統再現高度一致的 VP 色譜峰型。
為了驗證方法的耐用性，研究人員在 1.23 × 1013 GC/mL 的典型上樣濃度下，進行了連續 3 天的精密度測試。
• 數據亮點：連續 3 天的日間重復性好，VP3、VP2、VP1 比例的 RSD% 分別低至驚人的 0.2%、4.2% 和 1.4%。這充分證明了 Maurice 系統在全自動運行下的穩定性和抗干擾能力。
圖 3：多日精密度與重現性。在 1.23 × 1013 GC/mL 典型濃度下，Maurice 系統連續 3 天運行的 AAV9 樣品代表性電泳圖（B-D）及空白對照（A）。譜圖高度一致，展現了全自動運行下優異的抗干擾能力。
除了在 AAV9 上表現優異外，研究團隊還將該分析流程平移到了其他血清型中 。
• 數據亮點：成功測定了 AAV2（VP3:VP2:VP1 = 12.4:1.0:1.3）和 AAV8（7.1:1.4:1.0）樣品的蛋白比例。更值得一提的是，Maurice 的高分辨率甚至清晰地分離出了 AAV2 和 AAV8 樣品中的“前置 VP3 截短峰（VP3 clip）"。
圖 4：多血清型廣譜兼容。Maurice 系統不僅精準備測定 AAV9，更清晰分離了 AAV2（A）和 AAV8（B）中的前置 VP3 截短峰（VP3' clip），分辨率高。
NIFDC 的這項前沿研究證明 ProteinSimple Maurice CE-SDS 系統以其不可替代的核心價值，正成為基因治療領域的得力助手：
依托儀器優異的 220 nm UV 檢測基線與靈活的進樣控制，無需繁瑣的熒光標記，即可實現低豐度蛋白的真實絕對定量。
一切步驟（毛細管預處理、填膠、電動進樣、分離檢測）均由 Compass 軟件全自動預設執行。人為操作誤差降至低點。
無論是 AAV2、AAV8 還是 AAV9，Maurice 都能提供一站式的清晰分離方案。
* 全文實驗數據與技術細節參考原文：
Li Y, Sun Y, Li X, et al. Determination of AAV Capsid Protein Ratios by Sodium Dodecyl Sulfate Capillary Electrophoresis (CE‐SDS)—UV Absorption Method[J]. Electrophoresis, 2026.
* 本文轉載自「ProteinSimple」微信公眾號
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